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Miltenyi Tumor Dissociation Kit：腫瘤研究的高效組織解離工具

更新時間：2025-05-02 點擊次數(shù)：740

在腫瘤研究領(lǐng)域，將腫瘤組織解離為單細胞懸液是進行深入細胞分析、功能研究以及開發(fā)新型治療策略的關(guān)鍵起始步驟。Miltenyi Biotec 推出的 Tumor Dissociation Kit（貨號 130 - 095 - 929）專為科研人員提供了一種高效、可靠且便捷的腫瘤組織解離解決方案，已成為眾多實驗室的得力助手。

一、產(chǎn)品設(shè)計與原理

多酶混合體系：該試劑盒包含多種經(jīng)過優(yōu)化配比的酶混合物，這些酶能夠特異性地作用于腫瘤組織中的細胞外基質(zhì)成分和細胞間連接蛋白。例如，其中的蛋白酶可水解細胞間的膠原蛋白和纖維連接蛋白，而核酸酶能降解組織中釋放出的 DNA，防止細胞聚集，從而實現(xiàn)溫和且高效的組織解離，減少對細胞的損傷，維持細胞的高活性和表面抗原表位完整性。

配套緩沖液系統(tǒng)：試劑盒中的緩沖液不僅為酶提供了適宜的反應(yīng)環(huán)境，維持 pH 值和離子強度的穩(wěn)定，還能在解離過程中保護細胞免受滲透壓變化和氧化應(yīng)激的影響。同時，緩沖液中的特殊成分有助于去除組織中的雜質(zhì)，提高單細胞懸液的純度，為后續(xù)實驗提供更優(yōu)質(zhì)的樣本。

二、產(chǎn)品優(yōu)勢

廣泛的腫瘤類型適用性：該試劑盒經(jīng)過大量實驗驗證，適用于多種原發(fā)性腫瘤和異種移植物的解離，包括但不限于乳腺癌、胰腺癌、結(jié)腸癌、肺癌等常見實體瘤，以及黑色素瘤等皮膚腫瘤。無論是新鮮獲取的腫瘤組織樣本，還是經(jīng)過短期保存的樣本，都能實現(xiàn)高效解離，滿足不同腫瘤研究場景的需求。

高細胞產(chǎn)率與活力：通過優(yōu)化的酶解配方和溫和的解離條件，該試劑盒能夠從腫瘤組織中獲得數(shù)量可觀的單細胞，顯著提高腫瘤細胞和腫瘤浸潤淋巴細胞（TILs）的產(chǎn)率。同時，細胞活力得到有效保障，活細胞比例通常可達 80% 以上，為后續(xù)的細胞培養(yǎng)、流式細胞術(shù)分析、單細胞測序等實驗提供充足且高質(zhì)量的細胞來源。例如，在對乳腺癌組織的解離實驗中，與傳統(tǒng)手工解離方法相比，使用 Tumor Dissociation Kit 獲得的單細胞數(shù)量增加了 30%，且細胞活力更高，為深入研究乳腺癌細胞的特性和功能提供了更豐富的樣本資源。

出色的抗原表位保留：在腫瘤研究中，準(zhǔn)確識別和分析細胞表面抗原對于鑒定細胞類型、研究細胞功能以及開發(fā)免疫治療靶點至關(guān)重要。Miltenyi Tumor Dissociation Kit 在解離過程中能最大限度地保留細胞表面的抗原表位，確保后續(xù)基于抗體的檢測和分析方法（如免疫熒光染色、流式細胞術(shù)分選等）的準(zhǔn)確性和可靠性。這使得科研人員能夠更精準(zhǔn)地對腫瘤細胞和腫瘤微環(huán)境中的各類免疫細胞進行分型和功能研究，為揭示腫瘤發(fā)生發(fā)展機制和開發(fā)創(chuàng)新治療方法提供有力支持。

操作簡便與節(jié)省時間：試劑盒的操作流程經(jīng)過精心設(shè)計，簡單易懂，即使是經(jīng)驗相對較少的科研人員也能快速上手。與傳統(tǒng)的手工解離方法（如剪刀剪碎組織后長時間酶解）相比，使用該試劑盒配合 gentleMACS Octo 等自動化組織解離設(shè)備，可將整個解離過程縮短至 2 - 3 小時，大大節(jié)省了實驗時間和人力成本。同時，自動化設(shè)備的使用減少了人為操作差異，提高了實驗結(jié)果的可重復(fù)性和穩(wěn)定性，為大規(guī)模腫瘤樣本處理提供了高效解決方案。

三、實驗流程

樣本準(zhǔn)備：新鮮獲取的腫瘤組織應(yīng)盡快置于預(yù)冷的保存液中，若不能立即進行解離，可在 4℃短暫保存，但需避免長時間放置導(dǎo)致組織自溶。對于冷凍保存的腫瘤組織，需在 37℃水浴中快速解凍后進行后續(xù)處理。

組織切割：將腫瘤組織轉(zhuǎn)移至無菌培養(yǎng)皿中，用無菌手術(shù)刀或剪刀將其切成約 1 - 2mm3 的小塊，盡量保證組織塊大小均勻，以促進酶解反應(yīng)的一致性。

酶解反應(yīng)：將切好的組織小塊轉(zhuǎn)移至 gentleMACS C 管中，加入適量的 Tumor Dissociation Kit 中的酶混合液，確保組織塊浸沒。旋緊管蓋后，將 C 管放入 gentleMACS Octo 八通道組織解離器中，選擇針對人腫瘤組織優(yōu)化的內(nèi)置程序（如 37C_h_TDK_3 等），啟動解離程序。設(shè)備會通過機械振蕩和酶解的協(xié)同作用，在設(shè)定的時間和溫度條件下對組織進行高效解離。

細胞懸液制備：解離程序結(jié)束后，取出 C 管，將細胞懸液通過 70μm 的 MACS SmartStrainers 細胞濾網(wǎng)過濾至離心管中，以去除未解離的組織碎片和細胞團塊。隨后，對濾液進行離心，棄去上清液，用適量的緩沖液重懸細胞沉淀，即可得到單細胞懸液。

細胞分析與應(yīng)用：獲得的單細胞懸液可直接用于多種下游實驗，如通過臺盼藍染色法或細胞計數(shù)儀檢測細胞數(shù)量和活力；利用流式細胞術(shù)對腫瘤細胞和免疫細胞進行分型和功能分析；進行單細胞測序，深入探究腫瘤細胞的基因表達譜和分子特征；用于細胞培養(yǎng)，開展腫瘤細胞的增殖、遷移、侵襲等功能實驗；還可用于制備腫瘤類器官，模擬腫瘤的生長和發(fā)展過程，為腫瘤藥物研發(fā)和個性化治療提供更有效的模型。

四、應(yīng)用案例

腫瘤免疫研究：在一項關(guān)于腫瘤免疫逃逸機制的研究中，科研人員使用 Miltenyi Tumor Dissociation Kit 從肺癌患者的腫瘤組織中獲得高純度的腫瘤細胞和腫瘤浸潤淋巴細胞。通過流式細胞術(shù)分析，發(fā)現(xiàn)腫瘤微環(huán)境中存在大量免疫抑制細胞，且這些細胞表面的某些免疫檢查點分子表達上調(diào)。進一步對這些細胞進行單細胞測序，揭示了腫瘤細胞與免疫細胞之間復(fù)雜的相互作用網(wǎng)絡(luò)，為開發(fā)針對肺癌的免疫治療新策略提供了重要理論依據(jù)。

腫瘤藥物研發(fā)：某制藥公司在開發(fā)新型抗腫瘤藥物時，利用該試劑盒將人源腫瘤異種移植物（PDX）模型的腫瘤組織解離為單細胞懸液，然后將這些細胞接種到 96 孔板中進行藥物敏感性測試。由于使用 Tumor Dissociation Kit 獲得的細胞活性高且表型穩(wěn)定，實驗結(jié)果能夠準(zhǔn)確反映藥物對腫瘤細胞的抑制效果，大大提高了藥物篩選的效率和準(zhǔn)確性，加速了新型抗腫瘤藥物的研發(fā)進程。

腫瘤單細胞測序：在一項旨在繪制腫瘤單細胞圖譜的大型研究項目中，研究團隊使用 Miltenyi Tumor Dissociation Kit 對來自不同腫瘤類型和不同分期的大量腫瘤組織樣本進行解離，成功獲得了高質(zhì)量的單細胞懸液。通過單細胞 RNA 測序技術(shù)，他們繪制了詳細的腫瘤單細胞圖譜，發(fā)現(xiàn)了一些新的腫瘤細胞亞群及其特異性標(biāo)志物，為深入理解腫瘤的異質(zhì)性和精準(zhǔn)治療提供了豐富的數(shù)據(jù)資源。

Miltenyi Tumor Dissociation Kit 憑借其的設(shè)計、顯著的優(yōu)勢以及廣泛的應(yīng)用，為腫瘤研究領(lǐng)域的科研人員提供了一種高效、可靠的組織解離解決方案。無論是基礎(chǔ)研究還是轉(zhuǎn)化應(yīng)用，該試劑盒都能助力科研人員突破實驗瓶頸，推動腫瘤研究取得新的進展，是腫瘤研究實驗室的重要工具。